研究中使用的所有動物都是幼動物或成年動物，分別使用了雄性魚和雌性魚。測試容器包含一個中央的白色分隔器和一個紅色的卡片，用來區分兩部分。在分隔板的底部有足夠的空間，讓魚從魚缸的一邊游到另一邊。之所以使用彩色卡片，是因為斑馬魚能夠看到并對紅色等顏色做出反應。在行為研究開始時，動物的飲食限制至少24小時，基于大鼠和小鼠常用的交替任務（T迷宮），為斑馬魚設計了一個簡單的空間交替范例。該范例來評估斑馬魚的空間學習和記憶功能。斑馬魚可以在短時間內學習簡單的空間交替范式，該任務可能有助于表征斑馬魚學習和記憶功能。

實驗測試程序

試驗開始于在中央分隔器區域的水箱玻璃，然后在5秒內展示食物。食物最初是在有紅色提示的水箱一側，然后在卡片對面的一側。在28次試驗中，繼續交替呈現食物。每次只提供少量的食物，以避免動物的飽足。一個正確的反應被認為是在試驗期間，用來展示食物的水箱一側的動物的身體存在。記錄所有三個時間點的觀察結果，對任務的學習有兩種決定方式。在這兩種情況下，動物都是以隨機或接近隨機的機會或50%的正確選擇開始的。動物在空間交替任務和隨機食物展示中進行測試。隨機進行食物展示的動物被給予相同的測試箱和提示，但動物被給予預先設定的、計算機生成的和隨機順序的食物，而不是真正的交替方式。以這種方式記錄和分析所有時間點的反應。如果正確的選擇百分比為75%，則判定斑馬魚為學習任務。訓練動物在食物展示時100%正確反應，開始斑馬魚的空間交替記憶測試。將斑馬魚從測試池中取出10天，然后隨意喂食。10天后，經過訓練的動物被重新放入測試池，限制飲食24小時，并再次進行交替執行任務測試。記錄并分析了被實驗動物在所有時間點的反應。為了消除習得的行為，動物被訓練在展示食物展示時100%正確的選擇，然后在沒有食物獎勵的情況下測試任何正確的反應，記錄并分析所有的反應。

圖一 標準實驗槽

所有實驗均使用30×20×15厘米的水箱。屏障是白色層壓海報板，將水箱隔開成兩半。屏障的深度約為水高的三分之二，允許在屏障周圍和下方航行。水箱的一端貼有一張紅色海報板卡，作為視覺定位手段，并覆蓋水箱的一側。

圖二 斑馬魚（11只雄性，7只雌性）在空間交替任務中做出的正確選擇

將單個成年動物放入所述的水箱中。在三個時間點（提示、食物和食物后5秒）觀察魚并記錄數據。

圖三 記憶測試和習得行為的消退

將單個幼年動物（N = 6）放置在水箱中，并訓練其在食物呈現時做出100%正確的選擇。

參考文獻

Salas, C., Rodriguez, F., Vargas, J., Duran, E., Torres, B.,1996b. Spatial learning and memory deficits after telencephalic ablation in goldfish trained in place and turn mazeprocedures. Behav. Neurosci. 110, 965-980.

Wen, J.Y., Kumar, N., Morrison, G., Rambaldini, G.,Runciman, S., Rousseau, J., van der Kooy, D., 1997.Mutations that prevent associative learning in C. elegans.Behav. Neurosci. 111, 354-368.

Williams FE, White D, Messer WS. A simple spatial alternation task for assessing memory function in zebrafish. Behav Processes. 2002 Jun 28;58(3):125-132.

閱讀原文