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腦聲常談:動物模型構(gòu)建與評估︱小鼠暈動癥模型
暈動病是一種令人不適的自主神經(jīng)生理狀況,健康個體在經(jīng)歷被動運動甚至是虛幻的運動時都可能發(fā)生。暈動病的體征和癥狀包括面色蒼白、冷汗、打哈欠、干嘔和嘔吐、眩暈、厭食、嗜睡,甚至是劇痛。暈動病在不同物種間具有高度的保守性。
暈動癥造模
輕輕抓取小鼠,將其小心地放置在離心機的固定裝置中,確保小鼠的身體處于穩(wěn)定、舒適的狀態(tài),避免因固定不當造成小鼠身體損傷或影響實驗結(jié)果。一般可使用特制的小鼠固定架或固定籠,將小鼠固定在離心機的旋轉(zhuǎn)臂上。根據(jù)實驗設(shè)計,設(shè)置離心機的旋轉(zhuǎn)參數(shù),如旋轉(zhuǎn)軸數(shù)、峰值速度、角加速度和旋轉(zhuǎn)持續(xù)時間等。例如,可設(shè)置雙軸旋轉(zhuǎn),峰值速度為240°/s,角加速度為40°/s2,旋轉(zhuǎn)時間為40分鐘等不同的參數(shù)組合進行實驗。確認小鼠固定牢固和參數(shù)設(shè)置無誤后,啟動離心機,開始模擬暈動病的實驗操作。在離心機運行過程中,注意觀察離心機的運行狀態(tài),確保其正常運轉(zhuǎn),無異常噪音或震動等情況。當離心機停止旋轉(zhuǎn)后,立即啟動秒表,開始計時5分鐘的監(jiān)測時間。在這5分鐘內(nèi),密切觀察小鼠的行為變化,包括是否有活動減少、萎靡不振、身體顫抖、站立不穩(wěn)、轉(zhuǎn)圈行為、尋找角落躲避等表現(xiàn),記錄出現(xiàn)這些行為的時間點和持續(xù)時間。觀察小鼠是否出現(xiàn)糞便和尿失禁現(xiàn)象,記錄失禁的次數(shù)、量的多少等情況。通過視頻跟蹤系統(tǒng)或活動監(jiān)測設(shè)備,記錄小鼠在一定時間內(nèi)的移動距離、速度、活動時間等參數(shù)。暈動可能導(dǎo)致小鼠自主活動量減少,表現(xiàn)為移動距離縮短、速度減慢。
設(shè)置不同的旋轉(zhuǎn)條件,如單軸或雙軸旋轉(zhuǎn)、不同的峰值速度、角加速度和旋轉(zhuǎn)持續(xù)時間等,在旋轉(zhuǎn)結(jié)束后的5分鐘內(nèi)對小鼠的糞便和尿失禁等癥狀進行監(jiān)測,并根據(jù)這些情況計算暈動病指數(shù)MSI,以此作為評估暈動癥的標準。
行為學評估
1、探索行為:
觀察小鼠在新環(huán)境中的探索行為,如進入新區(qū)域的次數(shù)、在不同區(qū)域的停留時間等。暈動可能使小鼠的探索欲望降低,進入新區(qū)域的次數(shù)減少,在安全區(qū)域停留時間增加。
2、平衡與協(xié)調(diào)能力:
步態(tài)穩(wěn)定性:觀察小鼠行走時的足跡模式,包括步長、步寬、足跡的穩(wěn)定性等。健康小鼠在平衡木上行走時步態(tài)較為穩(wěn)定,速度均勻。而暈動癥小鼠可能會出現(xiàn)步態(tài)不穩(wěn)、左右搖晃、頻繁停頓或倒退等異常行為,這些表現(xiàn)都可作為判斷小鼠是否存在暈動癥及暈動癥嚴重程度的依據(jù)。
轉(zhuǎn)棒實驗:讓小鼠在旋轉(zhuǎn)的橫桿上保持平衡,記錄其在轉(zhuǎn)棒上的停留時間。暈動可能影響小鼠的平衡感,使其在轉(zhuǎn)棒上的停留時間縮短。
平衡木測試:評估小鼠暈動癥的常用方法之一,在正式測試前,將小鼠放置在平衡木所在的房間內(nèi)適應(yīng)環(huán)境1-2小時,使小鼠熟悉周圍環(huán)境,減少應(yīng)激反應(yīng)對實驗結(jié)果的影響。讓小鼠在平衡木上進行多次行走訓(xùn)練,每次訓(xùn)練時間為3-5分鐘,每天訓(xùn)練2-3次,連續(xù)訓(xùn)練2-3天,使小鼠逐漸掌握在平衡木上行走的技能,確保其在正式測試時的行為表現(xiàn)是基于自身的運動平衡能力,而不是對平衡木的陌生感。測試期記錄小鼠在一定時間內(nèi)(如3-5分鐘)在平衡木上的表現(xiàn)。觀察指標包括小鼠從平衡木一端走到另一端的時間、行走過程中掉落的次數(shù)、行走時的步態(tài)穩(wěn)定性,如是否出現(xiàn)搖晃、打滑、停頓等情況。正常小鼠經(jīng)過訓(xùn)練后,能夠在相對較短且穩(wěn)定的時間內(nèi)通過平衡木。若小鼠患有暈動癥,可能會因平衡感和空間定向能力受影響,導(dǎo)致通過平衡木的時間明顯延長。暈動癥小鼠可能由于前庭功能等受到影響,難以維持身體平衡,在平衡木上行走時掉落次數(shù)會顯著增加。
3、姿勢與體態(tài):
身體傾斜度:觀察小鼠在靜止和運動狀態(tài)下的身體傾斜角度,正常小鼠身體姿態(tài)較為平穩(wěn),暈動可能使小鼠身體向一側(cè)傾斜或出現(xiàn)搖晃。
豎毛反應(yīng):小鼠在暈動不適時可能會出現(xiàn)豎毛現(xiàn)象,即毛發(fā)豎起,可通過觀察豎毛的程度和持續(xù)時間來評估暈動情況。
前庭功能相關(guān)指標:
眼震反應(yīng):通過觀察小鼠在旋轉(zhuǎn)或其他前庭刺激下的眼球運動,記錄眼震的頻率、幅度和持續(xù)時間。眼震是前庭功能受到刺激的典型反應(yīng),暈動可能導(dǎo)致眼震異常。
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