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腦聲常談︱嚙齒類動物冷熱板測試方法總結
劇烈疼痛常難以控制,嚴重影響患者生活質(zhì)量。在疼痛近幾十年的研究歷史中,科學家們一直致力于復制出更能反映人類疼痛特性的動物模型。這些動物模型部分再現(xiàn)了人類所表現(xiàn)的疼痛、痛覺過敏以及輕觸、壓覺等引起的疼痛反應等癥狀。這些動物模型的成功復制,是研究疼痛產(chǎn)生機制的基礎,為人類認識疼痛的產(chǎn)生機制以及篩選更好的治療藥物提供了有效工具。
冷覺過敏癥的檢測是疼痛行為研究中一個非常重要的方法。冷熱板測痛儀一款多功能的熱疼痛閾值測試儀,適用于大鼠、小鼠麻醉、鎮(zhèn)痛、神經(jīng)性的藥物篩選,為相關鎮(zhèn)痛藥物研究。在測試室中,將一只小鼠放在穩(wěn)定在冰上4 °C的圓形有機玻璃板上五分鐘。當小鼠接觸到冷板時,會抬起爪子,抬起的次數(shù)將顯示動物對冷刺激程度的反應,通過記錄動物的反應時間(跳躍或舔腳表現(xiàn))來評估它們對熱或冷的疼痛反應。目前檢測疼痛的冷板設備主要為冷熱板測痛儀,可根據(jù)溫度變化調(diào)節(jié)實現(xiàn)冷刺激或熱刺激。
設備說明
鎮(zhèn)痛儀基于金屬板,可加熱至55°C并冷卻至-2°C(環(huán)境溫度在20°C至25°C之間)。電子恒溫器持板溫,前面板數(shù)溫度計見前板溫度。冷熱板設計為用非常簡單,且速致溫(自環(huán)境溫度至4°C,至閾值不至10分鐘,自4°C至55°C 5分鐘)。量者,精于0.5°C。前面板計時器示物為反應所需秒數(shù)。該裝置由一個圓柱形測試室組成,測試室位于一個 250 × 280 × 150 (mm) 的帶蓋有機玻璃板立方體箱中。蓋子固定在測試室頂部,防止小鼠跳出。試驗室底部的小孔用于融化的冰水流動。固定好冰塊后,將一個2毫米厚的圓形有機玻璃板緊緊地放在小室的冰塊上。使用表面溫度傳感器檢測板的表面溫度。將溫度傳感器放在平板表面后,可以在顯示器上讀取溫度的變化。在冰上放置 5 分鐘后,平板溫度穩(wěn)定在 4 ℃。為了測試小鼠的冷感覺過敏癥,將小鼠放在冰板上,計算小鼠抬起的頻率和時間,以評估小鼠的冷感覺過敏癥。
- 大小鼠冷熱板測痛儀,型號:XR1100,上海欣軟 -
為了評估這種方法,比較常用于測試三種常用的小鼠疼痛模型:福爾馬林試驗和慢性收縮性損傷(CCI)等。當冷熱板測痛儀板面溫度設定為4℃時,對造成坐骨神經(jīng)病理性疼痛模型的動物,受試藥物能很明顯地改變其在冷板上的抬足時間和次數(shù),當板面溫度設定為55℃時,對動物的生理性痛閾的高低能進行準確的測量,以此判定受試藥物的鎮(zhèn)痛類型和效果。為了評估小鼠對有害冷的反應,將小鼠放在有機玻璃室中的冷熱板儀器上,板溫設定為0 °C,并錄像3分鐘。
程序說明
在冷板試驗中,嚙齒動物爪子的收縮被視為刺激反應。該試驗有助于了解冷異感和痛覺減退。冷板溫度設定為 5°C。截止?jié)摲跒?30 秒。冷板溫度設定為 5°C。截止?jié)摲跒?0秒。將大鼠放入冷板裝置到反應(抬起后爪)之間的時間記錄為30秒,后爪)之間的時間進行記錄。在大鼠組中,測量第一次收回后爪的反應。在暴露于CCI的大鼠組中,受傷的后爪在所有情況下都是最先做出反應的。冷板的溫度保持5°C ,截止?jié)摲跒閷⒋笫蠓旁诶浒迳希涗洿笫筇鸷笞Φ臅r間。記錄后爪抬起的時間。在每種情況下,受傷的爪子都是最先做出反應的。動物被帶離籠子,以減少疼痛刺激。
程序步驟
建議先讓動物適應測試室。
使用前,用認可的消毒劑清潔冷盤表面。
將冷盤表面冷卻至實驗測試所需溫度范圍。
將動物放入測試儀器,動物的一般活動受到限制,但動物不受約束。
記錄動物出現(xiàn)爪縮、抖動或跳躍(較少見)等痛覺反應的潛伏期并記錄。一旦觀察到這種反應,立即將動物移走。
如果在20秒內(nèi)沒有反應,則將動物從儀器上移開。
動物在無拘束狀態(tài)下進行測試,能夠準確反映動物的痛覺行為,可對動物行為的潛伏期和固定時間內(nèi)舔足次數(shù)進行準確統(tǒng)計;
- 結果示意圖 -
參考文獻
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